请问高效液相和质谱联用的特点，如何提高高效液相的分析度？

特点是：色谱的优势在于分离，为混合物的分离提供了最有效的选择，但其难以得到物质的结构信息，主要依靠与标准物对比来判断未知物，对无紫外吸收化合物的检测还要通过其它途径进行分析。质谱能够提供物质的结构信息，用样量也非常少，但其分析的样品需要进行纯化，具有一定的纯度之后才可以直接进行分析。因此，人们期望将色谱与质谱联接起来使用以弥补这两种仪器各自的缺点。如何提高了分离度：用更柱效更高的色谱柱，或增加柱长，减小内径，减小粒度，使用梯度，改变流动相

其实最最重要的部分在于色谱柱的粒径。可以理解成UPLC是因为这种小粒径色谱柱的缘故而改造的。以往的色谱柱规格是5um粒径，比如最普通的C18长柱，规格就是5um，4.6mm*250mm。而超高效液相色谱仪上的柱子的粒径相对较小，比如有3.5um，有3.0um，甚至更小的还有2.0um的。因为粒径小了，所以固定相的表面积就变大了，比如5um的柱子就像是一条满是石头的河流，那么2.0um的柱子就是一条满是细沙的河流了。这样分离样品的速度更快，会很大程度上节省流动相，节省时间。但是相对的仪器的压力也会更高。所以超高效液相色谱仪的主要改良在于它的泵，还有各部件的耐压程度。一根小粒径的柱子如果放在普通的液相上，肯定柱压会超过压力上限，而且各个接口肯定会漏液。如果超高效液相色谱仪就可以很好地使用这种小粒径的色谱柱，从而节约成本，更快更好地完成实验。

高效液相色谱仪操作步骤如下：

1、 过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜.

2 、对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。

3 、打开hplc工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。

4 、进入hplc控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。

5、有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。

6、调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大，压力越大，一般不要超过2000。

7、设计走样方法。

8 、进样和进样后操作。

9 、关机时，先关计算机，再关液相色谱。

10 、填写登记本，由负责人签字。

11、流动相均需色谱纯度，水用20m的去离子水。

12 、柱子是非常脆弱的，第一次做的方法，先不要让液体过柱子。

13、所有过柱子的液体均需严格的过滤。

14、 压力不能太大，最好不要超过2000 psi。

高效液相色谱法（HighPerformanceLiquidChromatographyHPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。它是在生化和分析化学中常用的柱层析仪。 高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。 该方法有效方便快捷地解决化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中得出想要的数据，成为重要的分离分析技术。